iTRAQ/TMT定量蛋白质组学
技术简介
iTRAQ（isobaric tags for relative and absolute quantification）和TMT(Tandem Mass Tags)同位素标记定量技术是分别由SCIEX公司和Thermo公司研发的一种体外同种同位素标记的相对与绝对定量技术。该技术利用多种同位素试剂标记蛋白多肽多肽的氨基基团，经高精度质谱串联分析，可同时比较多达8-16种样品之间的蛋白表达量。
技术流程
iTRAQ/TMT试剂由三部分组成：报告基团、平衡基团和反应基团。反应基团形成8-16种等质量同位素标签；试剂标记酶解后的肽段，可与氨基酸N端及侧链的伯胺基团发生反应。在一级谱图中，来自于不同样本的同一肽段，标记后表现为相同的质荷比。在二级谱图中，报告基团、平衡基团和反应基团之间的键断裂，带不同同位素标签的同一肽段产生质量不同的报告离子，根据报告离子的丰度可获得样本间相同肽段的定量信息，再经过软件处理得到蛋白质的定量信息。
实验周期
自送样起 15个工作日
技术特点
A、蛋白通量高、分析范围广，适合广泛样品类型，动物组织、植物、细胞、细菌等；
B、定量准确，可信度高，实验可重现性高；
C、可同时对2-16种不同条件样品进行蛋白质差异分析
适用范围
适用于药物作用靶点、疾病标志物筛选、发病机理等研究；
适用于植物品种改良、作用机制研究、特殊蛋白筛选等；
仪器设备
Thermo Scientific Q Exactive HF-X
Thermo Scientific Orbitrap Fusion Lumos
Thermo Scientific Q Exactive
送样需知
| 适用样品 | 样品类型 | 推荐送样量 | 最低送样量 | 寄送方式 | 欢迎咨询 |
| 细胞 | 贴壁细胞、悬浮细胞 | 1×107个细胞 | 5×106个细胞 | 干冰寄送 （省外干冰量需保证有15kg-20kg，避免由于运输过程时间关系造成样品降解） |
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| 动物组织 | 常规组织（心，肝，皮，肉等） | 200mg | 50mg | ||
| 特殊组织（眼球，毛发，脑、骨头等） | 200mg | 100mg | |||
| 植物组织 | 植物叶片 | 200mg | 50mg | ||
植物根、茎、果实、种子 | 1g | 500mg | |||
藻类植物 | 1mL | 200uL | |||
| 微生物 | 革兰氏阴性细菌 | 200ul | 100uL | ||
| 革兰氏阳性细菌 | 1mL | 500uL | |||
| 真菌 | 3g | 1g | |||
| 液体 | 血清(收集好的全血室温静置2h，避免剧烈晃动以免发生溶血) | 1mL | 100uL | ||
| 血浆（收集好的全血加入抗凝管中，轻轻颠倒5-10次混匀，静置30min（避免剧烈晃动以免发生溶血） | 1mL | 100uL | |||
| 尿液 | 5mL | 1mL | |||
| 脑脊液、唾液、羊水 | 2mL | 200uL | |||
| 细胞上清 | 25mL | 10mL | |||
| 外泌体 | 300uL | 100uL |
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